〖图文并茂〗流式细胞术常用术语Part1

　　术语并非一成不变，而是反映了流式细胞仪技术中重要的概念，以及流式技术如何发展和变化。

　　下面从《Current Protocols in Cytometry》 (2005) 1.3.1-1.3.21中摘录并翻译一些术语，同时从网络搜集一些精彩配图，以图文并茂的方式分享给FLOWER，无论您是否新手，这些概念都受益匪浅，尤其对于流式抗体的临床验证，更是不可或缺。

　　精度（Accuracy）

　　测量值与真实值或期望值一致的程度。

　　校准微球（Alignment Particle）

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　　具有均匀尺寸、荧光和光散射特性的微球，用于检查流式细胞仪中激发和发射光学元件的是否对准了。校准微球应当在在所有检测器通道中都能发射荧光，这样才能同时检查所有通道。 当微球信号荧光强度最大而CV值最小时，说明光学器件的校准是最佳的。 颗粒越均匀，误差越小。良好的校准对于测量DNA是非常关键的，因为细胞之间的DNA含量相差非常小，没有足够的精度无法反映出细微变化。抗体结合能力（Antibody binding capacity，ABC）

　　在饱和染色条件下可以与细胞结合的特定类型的抗体的数目。自发荧光（Autofluorescence）

　　来自未加入染料或荧光素的细胞或颗粒的固有荧光。 人工制备的微球（例如塑料个珠）具有与淋巴细胞相似的自发荧光水平。上图中，FITC阴性样本中，同样具有与左侧阳性细胞一样的斜向峰，说明阳性样本中，斜向这群就是自发荧光。

　　背景（噪声、荧光、散射）

　　Background (noise, fluorescence, scatter)

　　当样品流中没有颗粒时却仍存在的信号。

　　背景噪声是限制荧光检测灵敏度的一个因素（见下面的荧光灵敏度和光散射灵敏度的定义）。根据试图检测的信号的低限不同，背景信号会有不同的主要来源。分别举例：

　　当激光器关闭，或流动室没有光激发时，检测器噪声是主要的背景信号来源。

　　对于光电倍增管（PMT），检测器背景噪声被称为暗电流，主要来自光电阴极的电子的随机发射。

　　对于光电二极管和其他固态检测器，主要来源于倍增器。

　　荧光噪声源包括：水和光学元件的拉曼散射来自样品或鞘流中未结合的荧光染料、试剂或污染物的荧光光学组件的荧光

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　　调整仪器，以使分析结果的物理测量更准确。这里使用的微球就是校准微球。

　　变异系数（Coefficient of variation，CV）

　　用于测量值分布宽度的统计学评估，CV＝标准差／均值。

　　对照样本（Control Sample）

　　与实验组或未知样品相同或几乎相同的方式制备出来的样本，应当给出预期的预定结果。

　　在免疫荧光分析中，阳性对照样品可以使用已知表达某标记的细胞，并与测试样品相同的抗体试剂。 阴性对照样品可以使用测试细胞，但不使用抗体试剂或使用不相关的抗体试剂。

　　流式中文网补充：

　　这种不加抗体的阴性对照，不太推荐用于设门，设门的最佳对照是生物阴性对照，就是说肯定不表达该标记的同类细胞，当然，实在找不到，可用标记正确同型对照，并且事先经Fc Block的阴性样本作为设门参照。更多内容，请点击菜单〖我〗－〖流式中文网手机版〗，然后搜索〖对照〗

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广而告之

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