在体外培养工作中，为了保留种子和长期保存培养物的活性，常须将培养物进行冷冻保存，并在需要的时候重新复苏和培养。目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。
关于细胞冻存 protocol 往往这么写（以下来自丁香通实验专区）：
方法一：标准的冻存程序为降温速率 -1～-2 ℃/ min；当温度达 -25 ℃ 以下时，可增至 -5 ℃～-10 ℃/min；到 -100 ℃ 时，则可迅速浸入液氮中。
方法二：将装有细胞的冻存管放入 -20 ℃ 冰箱 2 h ，然后放入 -80 ℃ 冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。
总结一下就是两个字......
慢 冷
各个实验室流传着不少招数来实现缓慢降温，比如使用装有异丙醇的程序降温盒，或者给冻存管包上棉花等等。实验室高大上可以用程序冷冻仪请忽略这场比试。
实际操作中如有不当容易形成冰晶，损伤娇贵的细胞，大大降低复苏活率。
无血清非程序细胞冻存液无疑是要进行大量细胞冻存实验的小伙伴的福音。冻存时无需程序降温，可直接放入 -80 ℃ 冰箱冷冻，大大节约了操作成本，并提高细胞活率。
试用福利
临床级无血清非程序细胞冻存液
默赛尔自主研发生产的临床级无血清非程序细胞冻存液，有效提高细胞复苏率和活力，无需繁琐的程序冻存步骤，可直接放入 -80 ℃ 冰箱，节省了大量时间和精力。
成分分析
➤ 添加细胞沉降稳定剂
可防止或延缓细胞在冻存过程中的沉降，防止细胞互相挤压，影响细胞冻存效果。
➤ 添加多种冷冻保护剂
如细胞膜保护剂、渗透性细胞膜内保护剂、非渗透性细胞保护剂等多种。它们在溶液中同水分子结合，发生水合作用，弱化水的结晶过程使溶液的粘性增加从而减少冰晶的形成，能大大降低细胞在冻存过程中冰晶对于细胞的损伤。
➤ 无任何外源血清成分
减少细胞污染机会。
➤ 严格的内毒素、pH、渗透压和微生物检测
确保产品不含细菌、真菌和支原体。
TESTS |
SPECIFICATION |
Endotoxin（内毒素） |
小于 0.25 EU/ml |
Mycoplasma（支原体） |
阴性 |
Sterility（微生物检查） |
阴性 |
Osmolarity（渗透压） |
280～340 msmol/kg |
pH |
7.0～8.5 |
优势对比
差异 |
国产S品牌细胞冻存液 |
美国A品牌无血清非程序细胞冻存液 |
默赛尔生物临床级无血清非程序细胞冻存液 |
冻存细胞时，是否程序降温 |
需要程序降温，后置于液氮保存 |
不需要程序降温，直接放入 -80 ℃ 冰箱，后置于液氮保存 |
不需要程序降温，直接放入 -80 ℃ 冰箱，后置于液氮保存 |
内毒素含量 |
大于 0.5 EU/ml |
小于 0.5 EU/ml |
小于 0.25 EU/ml |
价格 |
价格实惠 |
两倍价格 |
价格实惠，与国产 S 品牌相当 |
含量 |
100 ml/瓶 |
50 ml/瓶 |
100 ml/瓶 |
资质 |
无医疗器械资质 |
无医疗器械资质 |
I 类医疗器械生产许可 |
能否用于临床 |
不可以 含有动物血清 无临床准入资质 |
不可以 无临床准入资质 |
可以 无任何动物源性血清 有临床准入资质 |
复苏后活率对比
➤ 不同种类细胞冻存一周后的细胞活率
细胞系名称 |
国产S品牌细胞冻存液 |
美国A品牌无血清非程序细胞冻存液 |
默赛尔生物临床级无血清非程序细胞冻存液 |
UC-MSC |
79.2% |
90.3% |
93.4% |
NK |
78.3% |
82.6% |
88.9% |
CHO |
85.3% |
86.9% |
88.6% |
K562 |
87.1% |
89.2% |
91.5% |
不同种类细胞冻存液 -80 ℃ 冻存一周后复苏的细胞活率
A：国产 S 品牌细胞冻存液
B：日本 A 品牌无血清非程序细胞冻存液
C：默赛尔临床级无血清非程序细胞冻存液
➤ 细胞复苏后显微照片对比
不同种类细胞冻存液 -80 ℃ 冻存复苏后 48 h 的显微拍摄照片
A：国产 S 品牌细胞冻存液
B：日本 A 品无血清非程序细胞冻存液
C：默赛尔生物临床级无血清非程序细胞冻存液
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作者：通通
图片来源：丁香通客户
题图来源：通通
动图来源：soogif
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